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N-H 小鼠骨髓瘤淋巴細胞,ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻優培養條件
培養條件:
*培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛(niu)血清(qing)10%。
培養條件(jian):37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細(xi)胞(bao)后,取出培養瓶在倒置顯微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)生長情況。
(一(yi))如果細胞(bao)(bao)未長滿(man),用75%酒精噴灑(sa)整(zheng)個瓶(ping)消毒后(hou)放到超菌臺內,嚴(yan)格(ge)無菌操(cao)作,打開細胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養瓶(ping),吸出培(pei)(pei)養液,僅留下10ml培(pei)(pei)養液在(zai)瓶(ping)內繼續培(pei)(pei)養。
(二)如果(guo)細胞已(yi)長滿,即可進(jin)行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄去(qu)培養液,用PBS(不含鈣,鎂離(li)子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)瓶(ping)中,倒(dao)(dao)轉(zhuan)放于37度培養(yang)箱1-3分(fen)鐘預熱,然后又將培養(yang)瓶(ping)倒(dao)(dao)轉(zhuan)大(da)約(yue)30秒后,在倒(dao)(dao)置(zhi)顯微鏡下觀察細(xi)胞消化情(qing)況(kuang),若細(xi)胞大(da)部分(fen)變圓分(fen)散,輕敲幾下培養(yang)培養(yang)瓶(ping),細(xi)胞隨(sui)即脫(tuo)落(luo)下來(lai)。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基,吸出,分到新的培養(yang)瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天(tian)1次。
。
注意:傳代后一半(ban)用我(wo)們的(de)培養(yang)基,一半(ban)用你們的(de),以免細胞不適(shi)應而造
成生長不好。
凍(dong)存(cun)(cun)方法: 凍(dong)存(cun)(cun)液:基礎(chu)培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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