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Pcc4 小鼠畸胎瘤細胞,ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻優培養條件
Pcc4 小鼠畸胎瘤細胞
培養(yang)(yang)培養(yang)(yang)條件(jian):37.0C carbon dioxide(CO2),5%
條件:
*培養基(ji):DMEM高(gao)糖培養基(ji)90%;胎牛血清10%。
傳代方法:
收到細胞(bao)后(hou),取出培養瓶在倒置(zhi)顯微鏡下觀察細胞(bao)生長情況。
(一)如果細胞未長滿,用(yong)75%酒精噴灑整個(ge)瓶消毒(du)后放到超菌臺內(nei),嚴格無(wu)菌操(cao)作,打開細胞培養瓶,吸出培養液(ye),僅留下10ml培養液(ye)在瓶內(nei)繼續培養。
(二)如(ru)果細胞已(yi)長滿(man),即可進行傳代培養(yang)。具體步驟(zou)如(ru)下:
1. 棄(qi)去(qu)培養液,用PBS(不(bu)含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養(yang)瓶(ping)中,倒(dao)轉(zhuan)放(fang)于37度培(pei)養(yang)箱1-3分(fen)鐘預熱,然后(hou)又將培(pei)養(yang)瓶(ping)倒(dao)轉(zhuan)大約30秒后(hou),在(zai)倒(dao)置顯微鏡下觀察細(xi)(xi)胞消化情(qing)況,若細(xi)(xi)胞大部分(fen)變圓分(fen)散,輕敲幾下培(pei)養(yang)培(pei)養(yang)瓶(ping),細(xi)(xi)胞隨(sui)即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出(chu),分到新的培養瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次(ci)。
。
注意(yi):傳代后(hou)一半(ban)用(yong)我們的培養(yang)基,一半(ban)用(yong)你們的,以免細胞不(bu)適應而造
成生長不好。
凍存方法(fa): 凍存液:基(ji)礎培養基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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