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簡要描述:3T3-E1 小鼠胚成骨細(xi)胞(bao)(bao)(bao),ATCC 細(xi)胞(bao)(bao)(bao)|細(xi)胞(bao)(bao)(bao)系|細(xi)胞(bao)(bao)(bao)株|腫瘤細(xi)胞(bao)(bao)(bao)|細(xi)胞(bao)(bao)(bao)|貼壁細(xi)胞(bao)(bao)(bao)|懸浮細(xi)胞(bao)(bao)(bao)|,細(xi)胞(bao)(bao)(bao)庫管理規范,提供的細(xi)胞(bao)(bao)(bao)株背景清楚,提供參考文獻和培養(yang)條件
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3T3-E1 小鼠胚成骨細胞,ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻優培養條件
3T3-E1 小鼠胚成骨細胞
培養條件:
*培(pei)養基:DMEM高(gao)糖培(pei)養基90%;胎牛血(xue)清10%。
培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細(xi)胞后,取(qu)出(chu)培養瓶在倒置顯微鏡下觀(guan)察細(xi)胞生長情(qing)況(kuang)。
(一(yi))如果細(xi)胞(bao)未(wei)長滿,用75%酒精噴(pen)灑整個瓶消毒(du)后放(fang)到超菌(jun)臺(tai)內,嚴格無菌(jun)操作,打(da)開細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)瓶,吸出(chu)培(pei)養(yang)液,僅留(liu)下10ml培(pei)養(yang)液在瓶內繼續培(pei)養(yang)。
(二)如(ru)果細胞已長滿(man),即可進行傳代培養(yang)。具體步驟如(ru)下(xia):
1. 棄去培養液,用PBS(不(bu)含鈣,鎂離(li)子)洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)中,倒(dao)轉(zhuan)放于(yu)37度培(pei)(pei)養(yang)箱1-3分鐘預熱,然后又將(jiang)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)倒(dao)轉(zhuan)大約30秒后,在倒(dao)置顯微鏡下(xia)觀察(cha)細胞消化情況,若(ruo)細胞大部分變圓分散,輕敲幾下(xia)培(pei)(pei)養(yang)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping),細胞隨即脫(tuo)落下(xia)來。
3. 加入(ru)6-8ml*培養(yang)基,吸出,分到新的培養(yang)瓶中。1:3~1:6傳(chuan)代;2~3天1次。
。
注意:傳代后一半用我們的(de)培養基,一半用你們的(de),以免(mian)細胞不適應(ying)而造
成生長不好。
凍(dong)存方(fang)法(fa): 凍(dong)存液:基礎(chu)培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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