簡要描述:INS-1 大鼠胰島素細胞(bao)(bao)(bao)(bao),ATCC 細胞(bao)(bao)(bao)(bao)|細胞(bao)(bao)(bao)(bao)系(xi)|細胞(bao)(bao)(bao)(bao)株|腫(zhong)瘤(liu)細胞(bao)(bao)(bao)(bao)|細胞(bao)(bao)(bao)(bao)|貼壁細胞(bao)(bao)(bao)(bao)|懸浮細胞(bao)(bao)(bao)(bao)|,細胞(bao)(bao)(bao)(bao)庫管理規范,提供的細胞(bao)(bao)(bao)(bao)株背景清楚,提供參考文獻和培養條(tiao)件(jian)
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INS-1 大鼠胰島素細胞,ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細(xi)胞庫管(guan)理規范,提供的細(xi)胞株背(bei)景清楚,提供參考文(wen)獻優(you)培(pei)養條(tiao)件
INS-1 大鼠胰島素細胞
Complete growth medium:RPMI1640+0.11g/L L-Glutamine +0.11g/L 丙酮酸鈉+5.6 MMOL/L 葡萄糖(tang)+ 1ml/L 2 –mercaptoethanol + 10%FBS
Temperature: 37.0℃
Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
傳代方法:
收到細胞后(hou),取出(chu)培養瓶在倒(dao)置顯微鏡下觀察細胞生長(chang)情(qing)況。
(一(yi))如果細胞未(wei)長滿,用75%酒(jiu)精噴灑整個瓶(ping)(ping)消毒后(hou)放(fang)到(dao)超菌臺內,嚴(yan)格無菌操(cao)作,打開細胞培(pei)養瓶(ping)(ping),吸出培(pei)養液,僅留下10ml培(pei)養液在瓶(ping)(ping)內繼(ji)續(xu)培(pei)養。
(二)如果細(xi)胞已長滿,即可進行傳代培(pei)養。具體(ti)步驟如下:
1. 棄去培養(yang)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)養瓶中,倒轉放(fang)于37度培(pei)養箱1-3分鐘預熱,然后又(you)將(jiang)培(pei)養瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微(wei)鏡(jing)下(xia)(xia)觀察細(xi)胞(bao)消化情況,若細(xi)胞(bao)大部(bu)分變圓分散,輕敲幾下(xia)(xia)培(pei)養培(pei)養瓶,細(xi)胞(bao)隨(sui)即脫落下(xia)(xia)來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養基,吸出,分到(dao)新的培(pei)養瓶(ping)中(zhong)。1:3~1:6傳(chuan)代(dai);2~3天1次。
。
注意:傳代后(hou)一半(ban)用我們(men)的培養基(ji),一半(ban)用你(ni)們(men)的,以(yi)免細胞不(bu)適應而造
成生長不好。
凍存(cun)方法: 凍存(cun)液:基(ji)礎培養(yang)基(ji)+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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