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208F 大鼠成纖維細胞, ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻優培養條件
208F 大鼠成纖維細胞 的詳細介紹
培養(yang)條件: | *培養基: EMEM,90%; 胎牛血清或(huo)新生牛血清, 10%。 培養(yang)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5% | |
傳代方(fang)法(fa): | 收到細胞(bao)后,取(qu)出(chu)培養(yang)瓶在倒置顯微(wei)鏡下觀察(cha)細胞(bao)生(sheng)長情況。 (一)如(ru)果(guo)細(xi)(xi)胞未長滿,用75%酒(jiu)精噴(pen)灑(sa)整個瓶(ping)消毒(du)后放(fang)到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細(xi)(xi)胞培(pei)養(yang)瓶(ping),吸出(chu)培(pei)養(yang)液(ye),僅留(liu)下10ml培(pei)養(yang)液(ye)在瓶(ping)內繼續培(pei)養(yang)。 (二)如(ru)(ru)果細胞已長(chang)滿,即可進行傳代培養。具(ju)體步(bu)驟如(ru)(ru)下: 1. 棄去(qu)培養(yang)液,用PBS(不(bu)含鈣(gai),鎂離子)洗1-2次。 2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶(ping)(ping)中,倒轉(zhuan)放于37度(du)培養箱1-3分(fen)(fen)鐘預(yu)熱,然后(hou)又將培養瓶(ping)(ping)倒轉(zhuan)大約30秒后(hou),在倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察細胞消化情況,若(ruo)細胞大部分(fen)(fen)變圓分(fen)(fen)散,輕敲幾下培養培養瓶(ping)(ping),細胞隨即脫(tuo)落下來(lai)。 3. 加入6-8ml*培(pei)養基(ji),吸出,分(fen)到新的培(pei)養瓶中。一傳二(er)。 注(zhu)意(yi):傳代后一(yi)半用我們的培養基(ji),一(yi)半用你們的,以(yi)免細胞不適應而造 成(cheng)生長不好(hao)。 | |
凍存方法(fa): | 凍(dong)存(cun)液:95%*培養液,5%DMSO 儲存:液氮儲存 |
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