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KFMS 大林姬鼠皮膚成纖維樣細胞
ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和優培養條件
KFMS 大林姬鼠皮膚成纖維樣細胞的詳細介紹
培養條件:*培養基: DMEM高糖(tang)90%+10%胎牛血清
培養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞(bao)后,取(qu)出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞(bao)生長(chang)情(qing)況。
(一)如果細胞未長滿,用75%酒精(jing)噴灑整個瓶消(xiao)毒(du)后(hou)放(fang)到超菌臺內,嚴格無(wu)菌操作,打(da)開細胞培(pei)養瓶,吸出培(pei)養液(ye),僅(jin)留下10ml培(pei)養液(ye)在瓶內繼(ji)續(xu)培(pei)養。
(二(er))如(ru)果細胞已長滿(man),即可(ke)進行傳代培養。具體步驟如(ru)下:
1. 棄去培養液,用PBS(不含鈣(gai),鎂離子)洗(xi)1-2次。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養(yang)瓶中(zhong),倒(dao)轉(zhuan)放于37度培(pei)(pei)養(yang)箱1-3分鐘預(yu)熱,然后(hou)又將培(pei)(pei)養(yang)瓶倒(dao)轉(zhuan)大約30秒后(hou),在倒(dao)置顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察細胞消化(hua)情況,若細胞大部分變(bian)圓分散(san),輕敲幾下培(pei)(pei)養(yang)培(pei)(pei)養(yang)瓶,細胞隨即脫落(luo)下來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基,吸出(chu),分到新的培養(yang)瓶中(zhong)。一傳二。
注意(yi):傳代后一(yi)半用(yong)我們的培(pei)養基,一(yi)半用(yong)你們的,以免細胞不適應而造
成生長不好。
凍存方法: 凍存液:95%*培養(yang)液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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