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簡要描述:NBTF 新生牛眼囊成(cheng)纖(xian)維細(xi)(xi)胞(bao),ATCC 細(xi)(xi)胞(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)系|細(xi)(xi)胞(bao)株|腫(zhong)瘤(liu)細(xi)(xi)胞(bao)|細(xi)(xi)胞(bao)|貼壁細(xi)(xi)胞(bao)|懸浮細(xi)(xi)胞(bao)|,細(xi)(xi)胞(bao)庫(ku)管(guan)理規范(fan),提供(gong)的(de)細(xi)(xi)胞(bao)株背(bei)景清楚,提供(gong)參考文獻和*培養條件
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NBTF 新生牛眼囊成纖維細胞 的詳細介紹
NBTF 新生牛眼Tenon's囊成纖維細胞(bao)
培養條件:
*培養(yang)基:DMEM高(gao)糖培養(yang)基90%;胎牛血(xue)清10%。
培養條(tiao)件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長(chang)情況。
(一(yi))如(ru)果細胞(bao)未長滿,用75%酒(jiu)精噴灑整個瓶(ping)消毒后放(fang)到(dao)超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞(bao)培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping),吸出培(pei)(pei)養(yang)(yang)液,僅留下10ml培(pei)(pei)養(yang)(yang)液在(zai)瓶(ping)內繼(ji)續培(pei)(pei)養(yang)(yang)。
(二)如(ru)果細胞已長(chang)滿,即可(ke)進行(xing)傳代培養。具體(ti)步驟(zou)如(ru)下(xia):
1. 棄去培養液,用PBS(不(bu)含鈣,鎂離子)洗1-2次(ci)。
2. 加1ml消化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)(yu)培(pei)(pei)養瓶(ping)中,倒轉放于(yu)(yu)37度(du)培(pei)(pei)養箱1-3分鐘(zhong)預熱,然(ran)后又將培(pei)(pei)養瓶(ping)倒轉大約30秒后,在(zai)倒置顯微鏡下觀察細(xi)胞消化(hua)情(qing)況(kuang),若細(xi)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培(pei)(pei)養培(pei)(pei)養瓶(ping),細(xi)胞隨即脫落(luo)下來。
3. 加入6-8ml*培養(yang)基,吸出(chu),分到(dao)新的培養(yang)瓶中。1:3~1:6傳代(dai);2~3天1次(ci)。
。
注意:傳代(dai)后一半用我們的培(pei)養(yang)基,一半用你們的,以免細胞不適應而(er)造
成生長不好。
凍(dong)存方法: 凍(dong)存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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