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L8824 草魚肝臟細胞
ATCC 細胞|細胞系|細胞株|腫瘤細胞|細胞|貼壁細胞|懸浮細胞|,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景參清楚,提供考文獻和優培養條件
L8824 草魚肝臟細胞
培養條件:
*培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛血清10%。
培(pei)養條(tiao)件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收(shou)到細胞后,取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
(一)如(ru)果細胞未長(chang)滿,用75%酒精噴灑(sa)整(zheng)個瓶(ping)消(xiao)毒后放(fang)到超菌臺內(nei)(nei),嚴格無菌操作(zuo),打(da)開細胞培養瓶(ping),吸出培養液(ye),僅留下10ml培養液(ye)在瓶(ping)內(nei)(nei)繼(ji)續培養。
(二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養。具體步驟如下:
1. 棄(qi)去培(pei)養(yang)液,用PBS(不(bu)含鈣,鎂(mei)離子)洗(xi)1-2次(ci)。
2. 加1ml消(xiao)化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)(yang)瓶(ping)中,倒轉(zhuan)放于37度培養(yang)(yang)箱1-3分鐘(zhong)預熱,然后(hou)又(you)將培養(yang)(yang)瓶(ping)倒轉(zhuan)大(da)約30秒后(hou),在倒置顯微鏡下觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang),若細胞(bao)大(da)部分變圓分散,輕(qing)敲幾下培養(yang)(yang)培養(yang)(yang)瓶(ping),細胞(bao)隨(sui)即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養(yang)基(ji),吸出,分(fen)到新的培(pei)養(yang)瓶中。1:3~1:6傳代(dai);2~3天1次。
。
注意:傳(chuan)代后一(yi)半用我們(men)的(de)培養基,一(yi)半用你們(men)的(de),以免細胞不適(shi)應(ying)而造
成生長不好。
凍存(cun)方法(fa): 凍存(cun)液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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