簡要(yao)描述(shu):MDA-MB-435 人乳腺癌(ai)高轉(zhuan)移細(xi)(xi)(xi)胞(bao),ATCC 細(xi)(xi)(xi)胞(bao)|細(xi)(xi)(xi)胞(bao)系|細(xi)(xi)(xi)胞(bao)株(zhu)|細(xi)(xi)(xi)胞(bao),細(xi)(xi)(xi)胞(bao)庫管(guan)理(li)規范,提供的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)株(zhu)背景清楚,提供參(can)考文(wen)獻和(he)培養條件
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MDA-MB-435 人乳腺癌高轉移細胞,ATCC 細胞|細胞系|細胞(bao)(bao)株|細胞(bao)(bao)培養條件:
*培養基:DMEM高糖培養基90%;胎牛血清10%。
培養條(tiao)件(jian):37.0C carbon dioxide(CO2),5%
MDA-MB-435 人乳腺癌高轉移細胞傳代方(fang)法: 收到細胞后(hou),取出培養瓶在倒置(zhi)顯微鏡(jing)下(xia)觀察細胞生長情況(kuang)。
(一)如(ru)果(guo)細胞(bao)未(wei)長滿(man),用75%酒精噴(pen)灑(sa)整(zheng)個(ge)瓶(ping)消(xiao)毒后(hou)放到超(chao)菌臺內(nei),嚴格無菌操作,打開細胞(bao)培(pei)養瓶(ping),吸(xi)出培(pei)養液(ye),僅留下10ml培(pei)養液(ye)在瓶(ping)內(nei)繼(ji)續培(pei)養。
(二)如(ru)果(guo)細胞已(yi)長滿,含(han)即可(ke)進(jin)行傳代培養。具體步驟如(ru)下:
1. 棄(qi)去培養液,用(yong)PBS(不鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培(pei)(pei)養瓶中,倒轉(zhuan)放于37度培(pei)(pei)養箱1-3分(fen)鐘預熱,然后又將(jiang)培(pei)(pei)養瓶倒轉(zhuan)大約30秒后,在倒置顯(xian)微鏡下(xia)(xia)觀察細胞(bao)消化情況,若細胞(bao)大部分(fen)變圓分(fen)散,輕敲幾下(xia)(xia)培(pei)(pei)養培(pei)(pei)養瓶,細胞(bao)隨即脫落(luo)下(xia)(xia)來(lai)。
3. 加入6-8ml*培養基,吸出,分(fen)到新的(de)培養瓶(ping)中。1:3~1:6傳代(dai);2~3天1次(ci)。
。
注意:傳代后一半用我(wo)們的(de)培養基,一半用你(ni)們的(de),以(yi)免細(xi)胞不適應而造
成生長不好。
凍存方(fang)法: 凍存液:基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
儲存:液氮儲存
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