簡要(yao)描述:HPT-8 人(ren)飼養層上(shang)皮細(xi)胞(bao)(bao),ATCC 細(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)胞(bao)(bao)系|細(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)|腫瘤細(xi)胞(bao)(bao)|細(xi)胞(bao)(bao)|貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)(bao)|懸浮(fu)細(xi)胞(bao)(bao)|;細(xi)胞(bao)(bao)庫管理規(gui)范,提供的細(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)背景清楚,提供參考文獻和培(pei)養條件!
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HPT-8 人飼養層上皮細胞
培(pei)養(yang)條件:*培(pei)養(yang)基: DMEM高(gao)糖90%+10%胎牛血清
培(pei)養條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細胞后,取出培養瓶在倒(dao)置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
(一)如果(guo)細(xi)胞未長滿,用75%酒精(jing)噴灑整個瓶(ping)消(xiao)毒后(hou)放到超菌臺內(nei),嚴格無菌操作,打開細(xi)胞培養瓶(ping),吸出(chu)培養液(ye),僅留下10ml培養液(ye)在瓶(ping)內(nei)繼續(xu)培養。
(二)如果細胞已長(chang)滿,即可進行傳代培(pei)養。具體步驟如下:
1. 棄(qi)去培養液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加(jia)1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yang)瓶中(zhong),倒(dao)(dao)轉放(fang)于37度培養(yang)箱1-3分(fen)鐘預熱,然后(hou)(hou)又(you)將培養(yang)瓶倒(dao)(dao)轉大(da)約(yue)30秒后(hou)(hou),在倒(dao)(dao)置顯微鏡下(xia)觀察細胞(bao)消化情況,若細胞(bao)大(da)部分(fen)變圓分(fen)散,輕敲幾(ji)下(xia)培養(yang)培養(yang)瓶,細胞(bao)隨即脫落(luo)下(xia)來。
3. 加入6-8ml*培(pei)養(yang)基(ji),吸出(chu),分(fen)到新的培(pei)養(yang)瓶中。一傳二(er)。
注(zhu)意:傳代(dai)后一半用我們的培養基,一半用你們的,以免細胞不適應而造
成生長不好。
凍存方法(fa): 凍存液:95%*培養液,5%DMSO
儲存:液氮儲存
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