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293A 人胚腎細胞系.
培養條件(jian)： | *培養基(ji)：90%DMEM/F12（內含2mM L-glutamine）+10%胎牛(niu)血清 培養條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5% | |
傳代方法： | 293A 人胚腎細胞系. 收到細胞(bao)后，取出(chu)培(pei)養瓶在(zai)倒置顯微鏡下觀察細胞(bao)生長情況。 （一）如果細胞未長滿(man)，用(yong)75%酒(jiu)精噴灑整個瓶(ping)消毒后放(fang)到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yang)(yang)瓶(ping)，吸出培養(yang)(yang)液，僅留下10ml培養(yang)(yang)液在瓶(ping)內繼續培養(yang)(yang)。 (二)如(ru)果細(xi)胞(bao)已長(chang)滿，即(ji)可進(jin)行(xing)傳代培(pei)養。具體步驟(zou)如(ru)下： 1. 棄(qi)去培養液，用(yong)PBS（不含鈣，鎂(mei)離子）洗1-2次。 2. 加1ml消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒轉放(fang)于37度培(pei)(pei)養(yang)(yang)箱(xiang)1-3分鐘(zhong)預熱，然(ran)后又將培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)倒轉大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察(cha)細(xi)(xi)胞(bao)消化(hua)情況，若細(xi)(xi)胞(bao)大部(bu)分變圓分散(san)，輕敲(qiao)幾下培(pei)(pei)養(yang)(yang)培(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)，細(xi)(xi)胞(bao)隨即脫落下來。 3. 加(jia)入6-8ml*培養(yang)基，吸出(chu)，分到新的(de)培養(yang)瓶中。一傳二。 注意(yi)：傳代(dai)后一半用我們的(de)培養基，一半用你們的(de)，以免細胞不適應而造 成生(sheng)長不好。 | |
凍存方法(fa)： |
凍存(cun)液：95%*培養液，5%DMSO 儲(chu)(chu)存(cun)：液氮儲(chu)(chu)存(cun) | |
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